核酸提取或纯化试剂
¥648.00
CWY027S
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| 保存条件 | 运输条件 |
|---|---|
| 0-35℃ | 常温 |
适用于用柠檬酸盐、EDTA或肝素处理过的新鲜全血样本，不适用于加入抗凝剂的冷冻血液样本。
使用前需用无RNase水将红细胞裂解液（10×）进行10倍稀释，配制成1×工作液，置于2~8℃保存。
确保使用的是新鲜全血，而非冷冻血；裂解时可延长冰上孵育时间至20分钟，并在期间充分混匀。
可以，样品在裂解缓冲液中，可于-70℃保存一个月
1) 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2) 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3) 配制溶液应使用无RNase的水。
4) 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
如果要进行对微量DNA非常敏感的RNA实验，则用以下步骤替代步骤9：
1）向吸附柱中加入350 μL漂洗缓冲液1, 12,000 rpm离心15秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
2）配制DNase I 混合液：取70 μL DNase I反应液和10 μLDNase I储存液，轻柔混匀，配制成终体积为80 μL的混合液。
3）向吸附柱中直接加入80 μL配制好的DNase I混合液，20-30℃孵育15分钟。
4）向吸附柱中加入350 μL漂洗缓冲液1, 12,000 rpm离心15秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
1) 样本问题：样本不新鲜或反复冻融。
2) 操作问题：红细胞裂解不彻底（可延长冰上孵育时间至20分钟）、上清未彻底吸弃、裂解缓冲液中未加β-巯基乙醇。
3) 洗脱问题：洗脱缓冲液体积过小（应≥30 μL），或未室温静置1分钟。
1) 提高产量：可用30-50 μL新的洗脱缓冲液重复步骤13。
2) 提高浓度：将第一次洗脱出的溶液重新加回吸附柱中，再次离心洗脱。
